影響sod酶活性測定實驗中藥品配製方面要注意哪些問題

2021-04-22 15:04:20 字數 2516 閱讀 7199

1樓:**只為你存在

粘度法測高聚物分抄子量受諸多因素影響,比如:溫度,氣壓(液體上下表面氣壓差),粘度管口徑,粘度管是否垂直及是否乾淨,溶液密度,人的讀數誤差,秒錶精度等;而其測定的分子質量有限,只能在10^4-10^7的高聚物,超過或不滿的都不能測定。

在sod活性測定中影響本實驗準確性的主要因素是什麼?應如何克服?

2樓:小菌子

【注意事抄項】

取材時,要選取同

襲一個部位的葉片bai

,減du小試驗誤差。

zhi提取酶液離心時,一定要控制dao離心機溫度,因為高速離心產生的高溫可能使酶失活,影響結果。

顯色反應的各個溶液要按照順序新增。新增過程中嚴格控制光線,儘可能的折光。

日光燈下反應20min,要求各管受光情況一致,反應室的溫度高時時間可適當縮短,溫度低時時間可適當延長)。

測量吸光值時,速度要快,不必按順序測量,先測量後排序。準確記錄結果,認真分析。

推薦ph7.8最適,按邵從本等(1993)方法

測定酶活性的主要影響因素有哪些

3樓:淵源

1.反應速度

大多數酶促反應是可逆反應,其速度既受底物濃度的影響,也受產物生成量的影響。當底物濃度較高時,在反應的初期,其濃度變化甚微,產物生成量也很少,此時反應速度可看作是恆定的。酶反應動力學中所指速度就是反應的初速度。

2.底物濃度

米氏方程ν=νmax【s】/km+【s】是反映酶促反應速度與底物濃度關係的方程式,其中km稱米氏常數。

km值是酶的特徵常數之一,只與酶的性質有關,而與酶濃度無關。不同的酶,km值不同。同一個酶有幾種底物時,則對每一種底物各有一特定的km值,其中km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。

綜上所述,根據酶的特性及定量原理,測定酶活力時,必須注意以下幾點:

(1)酶促反應過程中,只有最初一段時間內反應速度與酶濃度成正比,隨著反應時間的延長,反應速度即逐漸降低。

(2)要規定一定的反應條件,如時間、溫度、ph等,並在酶測定過程中保持這些反應條件的恆定,如溫度不得超過規定溫度的士1℃,ph應恆定。

(3)配製的底物濃度應準確且足夠大,底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑並儲存於冰箱中,以防止底物被分解。

(4)標本要新鮮,由於絕大多數酶可因久置而活力降低,標本如無法及時測定,應儲存於冰箱中。用血漿時,應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高,為此在採血、分離血清時,應注意防止溶血和白細胞的破裂。

(5)在測定過程中,所用儀器應絕對清潔,不應含有酶的抑制物,如酸、鹼、蛋白沉澱劑等。

澱粉酶 活力測定實驗 中有哪些影響因素

4樓:

1.反應速度

大多數酶促反應是可逆反應,其速度既受底物濃度的影響,也受產物生成量的影響。當底物濃度較高時,在反應的初期,其濃度變化甚微,產物生成量也很少,此時反應速度可看作是恆定的。酶反應動力學中所指速度就是反應的初速度。

2.底物濃度

米氏方程ν=νmax[s]/km+[s]是反映酶促反應速度與底物濃度關係的方程式,其中km稱米氏常數。

km值是酶的特徵常數之一,只與酶的性質有關,而與酶濃度無關。不同的酶,km值不同。同一個酶有幾種底物時,則對每一種底物各有一特定的km值,其中km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。

綜上所述,根據酶的特性及定量原理,測定酶活力時,必須注意以下幾點:

(1)酶促反應過程中,只有最初一段時間內反應速度與酶濃度成正比,隨著反應時間的延長,反應速度即逐漸降低。

(2)要規定一定的反應條件,如時間、溫度、ph等,並在酶測定過程中保持這些反應條件的恆定,如溫度不得超過規定溫度的士1℃,ph應恆定。

(3)配製的底物濃度應準確且足夠大,底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑並儲存於冰箱中,以防止底物被分解。

(4)標本要新鮮,由於絕大多數酶可因久置而活力降低,標本如無法及時測定,應儲存於冰箱中。用血漿時,應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高,為此在採血、分離血清時,應注意防止溶血和白細胞的破裂。

(5)在測定過程中,所用儀器應絕對清潔,不應含有酶的抑制物,如酸、鹼、蛋白沉澱劑等。

測定酶活性的條件是什麼

5樓:胡道增

我國檢驗學會檔案中對最適條件是這樣提出:①選合適的底物、輔因子、活化劑、變構劑的種類和濃度。②指示酶和輔助酶的種類和濃度。

③反應混合液的最適ph,緩衝液種類和濃度。④其它影響酶活性的因素,如去除各種抑制劑。並提出:

在某些情況下,為了獲得更好的測定重複性或更大的臨床價值,可考慮對上述「最適條件」作適度的修改。

6樓:匿名使用者

各種酶有各自最佳的酶活性溫度和ph等,不能一概而論。

酶活性可根據米氏方程測定若干個點,做出1/v與1/s圖,然後找出相應濃度下的酶活即可。

7樓:匿名使用者

酶活性用km值表示,做出1/v與1/s圖即可

影響酶活性的條件有哪些,影響酶活性的因素

凡能影響蛋白質的理化因素都能影響酶的活性。因此溫度 酸鹼度 重金屬離子都能影響酶的活性。高溫 強酸 強鹼等因素均可引起酶喪失催化能力。1 酶的濃度 越高,活力越大2 底物濃度 越大,結合的酶越多3 溫度專 37 活力最好4 ph 酶需要ph多數在屬7.4左右活力最大,少數酶在酸性或鹼性溶液活力最高如...

過氧化物酶活性的測定中,結果怎麼處理,酶活性怎麼計算

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