1樓:南京金益柏生物科技****
因為加bai入過多的酵母細胞,反而抑制du了pcr反映的進行。後來用zhi
dao5%dmso處理,結果很好,可以清楚地看內見兩條帶,和expression kit上面說容的也吻合(sali線性化his+mut+佔大部分)--10/14個測試菌落。
(萬分火急)轉化子的菌落pcr原理是什麼?
2樓:樂觀的無
如果轉化成功的話,菌落裡的菌就含有你克隆的質粒載體了,用槍頭直接碰一下,然後作為pcr模板,就可以進行pcr擴增了。但是菌落pcr鑑定的假陽性率其實也不低,所以建議你挑取菌落擴培之後抽提質粒,進行酶切鑑定,這樣比較準確,酶切鑑定確認好之後再去測序以確定沒有鹼基突變或缺失。
你說的t7通用引物是指載體上的t7 promtor引物嗎?那只是一條引物啊,如果加上gbh下游引物的話,擴增出來的就是你連線進去的目的基因的長度了。
3樓:匿名使用者
跟普通pcr的原理一樣 只不過模板不同 如果已經成功轉化 則含有你的目的片段 就以這個目的片段作為模板來進行擴增
菌落PCR怎麼做，菌落PCR的操作步驟及儀器有哪些？
如果是革蘭氏陰性菌比如大腸桿菌還好，陽性菌幾乎不能成功，因為有很厚的胞壁沒法破壁。而陰性菌成功率也不是很高，就用牙籤在菌落上挑一點到pcr體系裡。但要考慮的是即使鑑定出轉化子後你怎麼儲存這個菌落？再回板上找那個被挑過的殘存菌落嗎？與其這樣不如多花幾個小時搖菌液再pcr吧 不是特別明白你所提出的問題，...
細菌菌落的菌落形態，什麼是細菌的菌落形態？
可以從菌落的菌落的形態 排列方式等方面描述。菌落形態包括菌落的大小 形狀 邊緣 光澤 質地 顏色和透明程度等。每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特徵。不同種或同種在不同的培養條件下，菌落特徵是不同的。這些特徵對菌種識別 鑑定有一定意義。菌落 colony 是由單個細菌 或其他微生物 細胞或一堆同種...
細菌菌落特點，細菌菌落特點有哪些？
細菌菌落特徵 一般呈現較溼潤 較光滑 較透明 較粘稠 易挑取 質地均勻 小而突起或大而平坦 菌落正反面或邊緣與 部位的顏色一致 一般有臭味或酸敗味等。細菌菌落特點有哪些？細菌菌落，真菌菌落的特點 細菌菌落 大小 小。形狀 光滑，粘稠或粗糙乾燥。顏色 多為白色。真菌菌落 大小 大。形狀 絨毛狀，絮狀，...