液氮提取組織蛋白的原理是什麼

1樓：東哥講故事

液氮提取組織蛋白是一種常用的蛋白質提取方法，其原理主要涉及到液氮的低溫作用和機械破碎的效果。

通常情況下，要提取組織蛋白，需要將組織樣本切碎並釋放蛋白質，但常溫下進行樣本處理的過程中，蛋白質可能會因為酶的作用和氧化等因素而被降解或變世喚性，導致蛋白質的報告失真。因此，液氮提取組織蛋白的方法就被應用於保護蛋白質的完整性並確保其可靠的提取。

液氮是一種極低溫度的製冷劑，能夠迅速冷卻混合樣本，破壞細胞結構並抑制酶的活性搜殲凱。在液氮的作用下，組織樣本中的細胞被迅速凍結和變脆，可以更容易地進行機械破碎和蛋白質的釋放。

液氮提取過程通常分為以下幾個步驟：

1. 將新鮮組織樣本快速浸入液氮中，使用液氮將組織樣本迅速凍結，並保持其凍結狀態。

2. 用珂朵莉磨杯或高壓研磨器等機械工具將組織碾磨成細小粒子，進一步打破組織細胞結構，並將蛋白質完全釋放。

3. 在低溫下，含有改前組織蛋白的提取液或緩衝液將樣本溶解，並將細胞碎片和其他雜質分離。

4. 用離心、超濾、離子交換或其他方法進行純化和濃縮，以獲得純度更高的蛋白樣品。

總之，液氮提取組織蛋白的主要原理是冷凍和機械破碎，通過這種方法可以最大程度地保護蛋白質的完整性，並獲得高質量的蛋白樣品。

2樓：抗斌斌

液氮提取組織蛋白是一種常用的蛋白質提取方法，其原理是利用液氮的低溫特性將組織樣品迅速冷凍並破碎，使細胞膜和細胞壁破裂，釋放出細胞內的蛋白質。具體步驟如下：

1. 將組織樣品切成小塊，放入液氮中迅速冷凍，使細胞內的水分迅速凍結，防止蛋白質被降解。

2. 將冷凍的組織樣品放入研缽中，加入液氮，用研缽和研釘將樣品研磨成細粉末，破壞細胞膜和細胞壁，釋放出蛋白孫磨肆質。

3. 將研磨好的樣品加入提取則轎緩衝液中，離心去除細胞碎片和細胞核等雜質，得到蛋白質上清液。

4. 將蛋白質上清液進行蛋白質定量和分析，如sds-page電泳、western blot等。

液氮提取組織蛋白的優點是快速、高效、可靠，可以得到較高純度的蛋白質，適用於各種型別的生物樣品，如細胞、組織、血清、尿液等。但同時也存在遊野一些缺點，如操作複雜、需要液氮等特殊裝置、易受到氧化和降解等。