測定蛋白質含量的方法有哪些,其原理各是什麼

2021-05-23 18:40:27 字數 2305 閱讀 7822

1樓:匿名使用者

bradford法測定蛋白質濃度

(一)實驗原理

雙縮脲法(biuret法)和folin—酚試劑法(lowry法)的明顯缺點和許多限制,促使科學家們去尋找更好的蛋

白質溶液測定的方法。

2023年由bradford建立的考馬斯亮蘭法(bradford法),是根據蛋白質與染料相結合的原理設計的。這種蛋白

質測定法具有超過其他幾種方法的突出優點,因而正在得到廣泛的應用。這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質測定

法。考馬斯亮蘭g-250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰的位置(max),由465nm變為595n

m,溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。

在595nm下測定的吸光度值a595,與蛋白質濃度成正比。

bradford法的突出優點是:

(1)靈敏度高,據估計比lowry法約高四倍,其最低蛋白質檢測量可達1g。這是因為蛋白質與染料結合後產生

的顏色變化很大,蛋白質-染料複合物有更高的消光係數,因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比lowry法要大的

多。(2)測定快速、簡便,只需加一種試劑。完成一個樣品的測定,只需要5分鐘左右。由於染料與蛋白質結合的

過程,大約只要2分鐘即可完成,其顏色可以在1小時內保持穩定,且在5分鐘至20分鐘之間,顏色的穩定性最好。

因而完全不用像lowry法那樣費時和嚴格地控制時間。

(3)干擾物質少。如干擾lowry法的k+、na+、mg2+離子、tris緩衝液、糖和蔗糖、甘油、巰基乙醇、edta等均不

干擾此測定法。

2樓:匿名使用者

一般是測氮元素的含量,之前的三聚氰胺就是這樣矇混了質監局這關的,三聚氰胺氮含量超過60%

測定蛋白質含量的方法有哪些,其原理各是什麼

3樓:紅色獵人

①凱氏定氮法 原理:蛋白質平均含氮量為16%。

當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強鹼性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最後用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。

4樓:貊梓毓博明

bradford法測定蛋白質濃度

(一)實驗原理

雙縮脲法(biuret法)和folin—酚試劑法(lowry法)的明顯缺點和許多限制,促使科學家們去尋找更好的蛋

白質溶液測定的方法。

2023年由bradford建立的考馬斯亮蘭法(bradford法),是根據蛋白質與染料相結合的原理設計的。這種蛋白

質測定法具有超過其他幾種方法的突出優點,因而正在得到廣泛的應用。這一方法是目前靈敏度最高的蛋白質測定

法。考馬斯亮蘭g-250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰的位置(max),由465nm變為595n

m,溶液的顏色也由棕黑色變為蘭色。

在595nm下測定的吸光度值a595,與蛋白質濃度成正比。

bradford法的突出優點是:

(1)靈敏度高,據估計比lowry法約高四倍,其最低蛋白質檢測量可達1g。這是因為蛋白質與染料結合後產生

的顏色變化很大,蛋白質-染料複合物有更高的消光係數,因而光吸收值隨蛋白質濃度的變化比lowry法要大的

多。(2)測定快速、簡便,只需加一種試劑。完成一個樣品的測定,只需要5分鐘左右。由於染料與蛋白質結合的

過程,大約只要2分鐘即可完成,其顏色可以在1小時內保持穩定,且在5分鐘至20分鐘之間,顏色的穩定性最好。

因而完全不用像lowry法那樣費時和嚴格地控制時間。

(3)干擾物質少。如干擾lowry法的k+、na+、mg2+離子、tris緩衝液、糖和蔗糖、甘油、巰基乙醇、edta等均不

干擾此測定法。

蛋白質的測定都有哪些方法?它們的原理、方法、 操作特點、優缺點、適用範圍各是什麼?

5樓:匿名使用者

蛋白質的測定都有哪些方法?它們的原理、方法、 操作特點、優缺點、適用範圍各是什麼?

①凱氏定氮法   原理:蛋白質平均含氮量為16%。當樣品與濃硫酸共熱,蛋白氮轉化為銨鹽,在強鹼性條件下將氨蒸出,用加有指示劑的硼酸吸收,最後用標準酸滴定硼酸,通過標準酸的用量即可求出蛋白質中的含氮量和蛋白質含量。

測定蛋白質的定量的方法有哪些及其原理各是什麼

6樓:匿名使用者

在酸性條件下,考馬斯亮蘭g-250染料與蛋白質疏水區結合,導致最大吸收峰由465 nm 變為595 nm,同時顏色也由棕色變為藍色,該藍色化合物顏色的深淺與蛋白質濃度的高低成正比關係。將蛋白質樣品或稀釋的bsa 與bradford試劑混合

哪些食物富含蛋白質,富含蛋白質的食物有哪些?

含蛋白質多的食物包括 牲畜的奶,如牛奶 羊奶 馬奶等 畜肉,如牛 羊 豬 狗肉等 禽肉,如雞 鴨 鵝 鵪鶉 鴕鳥等 蛋類,如雞蛋 鴨蛋 鵪鶉 蛋等及魚 蝦 蟹等 還有大豆類,包括黃豆 大青豆和黑豆等,其中以黃豆的營養價值最高,它是嬰幼兒食品中優質的蛋白質 此外像芝麻 瓜子 核桃 杏仁 松子等乾果類的...

食品中蛋白質含量測定中影響準確性因素有那些

1 蛋白質的不同對測定結果的影響。當蛋白質不同,其包含的上述小基團含量發生變化時,就會影響蛋白質含量的測定。2 溶液中干擾物質的影響。蛋白質所包括的具有紫外吸收的小基團為常見基團,其產生紫外吸收的特異性並不強,一些高濃度的無機化合物也會對蛋白質的含量測定產生干擾,蛋白質是有機大分子,是構成細胞的基本...

高蛋白質高的食物有哪些,哪些食物含蛋白質高

動物蛋白 1.牲畜的奶,如牛奶 羊奶 馬奶等 2.畜肉,如牛 羊 豬肉等 3.禽肉,如雞 鴨 鵝 鵪鶉 駝鳥等 4.蛋類,如雞蛋 鴨蛋 鵪鶉蛋等及魚 蝦 蟹等 植物蛋白 1.大豆類,包括黃豆 大青豆和黑豆等,其中以黃豆的營養價值最高。2.乾果類 芝麻 瓜子 核桃 杏仁 松子等。3.螺旋藻 含量列表 ...