1樓：蒼茫中的塵埃
在rna干擾實驗中
首先需要構建dsrna表達載體
表達產生的dsrna在dicer酶作用下形成sirna引起具有相同序列的mrna發生講解
導致細胞或個體不能合成相應的蛋白質
所以個體會表現出功能缺失表型
構建表達載體通常選用dsrna
需要注意的一些方面是
dsrna序列中gc的含量要小於50%
高gc含量會降低rnai的效果
選定的dsrna序列應通過搜尋資料庫確保與其他基因無同源性以避免對其他同源性基因表達的抑制
經常使用u6啟動子等rna聚合酶ⅲ能夠識別的啟動子序列最後將其轉入到質粒中
這裡說的只是一個簡單的過程
總的來說構建表達載體是個比較複雜的過程
如果要知道詳細的技術
建議還是去看書吧
這裡是說不清的
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