1樓：匿名使用者
先用標準溶液做標定曲線，然後再測未知溶液的吸收，對應到曲線上就行了
2樓：斛倫婁昭
1儀器與試劑
62616964757a686964616fe78988e69d8331333431353864 uv-260紫外分光光度計，vitc對照品及vitc片（規格:50mg）均由河南某藥廠提供，硫酸溶液（ph=6）。
2實驗操作
2.1標準曲線的繪製
精密稱取vitc對照品0.05g溶於100ml硫酸溶液，再稀釋成一系列不同濃度的對照品溶液（0～14μg/ml），分別測出其吸光度。然後以濃度為橫座標，以相應的吸光度為縱座標繪製出標準曲線。
該曲線是經過原點的一條直線，可求出該曲線的斜率。
2.2樣品測定
取vitc20片，精密稱定，研細，精密稱出適量（相當於vitc50mg），置於100ml量瓶中，加硫酸溶液溶解並稀釋至刻度，濾過，精密量取續濾液2ml置於另一100ml量瓶中，加硫酸溶液稀釋至刻度，測出其吸光度a
樣。由標準曲線查出樣品的濃度c
樣品［3］
。2.3
結果計算
根據精密稱出的樣品的質量、溶解及稀釋的體積可求出c樣。
vitc含量=c
樣品/c
樣或vitc含量=a
樣/k×c
樣注:k為標準曲線的斜率。3討論
維生素c的還原能力強而易被氧化，特別是在鹼性溶液中更易被氧化。另外在鹼性溶液或強酸性溶液中還能進一步發生水解。因此，選擇硫酸溶液使成弱酸性。
測定時溶液ph的選擇:維生素c的紫外最大吸收波長與溶液的ph值有著密切關係。在ph=2.
0時，溶液的最大吸收波長在245nm;在ph=12時，溶液的最大吸收波長在300nm;在ph=5～10範圍時，溶液的最大吸收波長在267nm，況且在ph=6.0時吸收度值最大。所以，選擇測定溶液的ph=6.
0。本方法對儀器的要求不是很高，適用於大批量樣品的定量分析。但是，若儀器搬動或重新校正波長、或者更換儀器時，標準曲線必須重新繪製。
水果中維生素c含量的測定方法有幾種
3樓：匿名使用者
水果中維生素c含量的測定方法有三種，分別為原子吸收分光光度法、紫外可見分光光度法、高效液相色譜法。
1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問接測定維生素c的含量，是利用維生素c可以與一些金屬離子發生氧化還原反應，通過測定反應掉的金屬離子的量，進而間接計算出維生素c的含量。
2、紫外-可見分光光度法
利用紫外-可見分光光度法測定維生素c的含量是基於維生素c在紫外光區有特徵吸收，但是因為維生素c結構中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩定存在，直接測定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測定時，維生素標準溶液和待測樣的配製條件非常重要。
3、高效液相色譜法
高效液相色譜法是以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將維生素c的溶劑裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而測量出維生素c的含量。
擴充套件資料
維生素c含量的測定方法對比：
由於維生素c自身的不穩定，導致了很多方法測定結果誤差較大，所以對維生素c穩定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因為測定較準確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發展前景，是目前發展較快的一種方法。
4樓：匿名使用者
vc具有抗壞血病的效應,所以又稱抗壞血酸(ascorbicacid).它是人體不可缺少的一種重要營養物
質,常存在於新鮮的蔬菜和水果中.由於抗壞血酸參與體內一系列代謝和反應,能促進膠原蛋白和粘多糖
的合成,增加微血管的緻密性,降低其通透性及脆性,增加機體抵抗力.缺乏時,引起造血機能障礙、貧血、
微血管壁通透性增加,脆性增強和血管容易破裂出血,嚴重時肌肉、內臟出血死亡,這些症狀在臨床上通常
稱為壞血病.因此抗壞血酸不僅是人體所必須的由外界提供的營養物質,同時也是維持正常生命過程所必
需的一類有機物.人正常每天最低需要量為75mg,長期缺乏抗壞血酸會導致某種營養不良症狀及相應的
疾病,所以,vc對維持人體健康十分重要.對部分食品中的營養成分———抗壞血酸的含量做一些測定,為
指導人們合理膳食,正確補充營養素有一定意義.
目前測定抗壞血酸的方法有2, 6-二氯靛酚滴定法、2, 4-二硝基苯肼分光光度法[1]、熒光分光光度
法、近紅外分光光度法[2]、電位滴定法[3-4]、鉬藍比色法[5]、褪色光度法[6]、高效液相色譜法[7]等.不同方
法各有其長處,但也有一定的侷限性.如2, 6-二氯酚滴定法及2, 4-二硝基苯肼光度法操作複雜,測試條
件較為嚴格. 2, 4-二硝基苯肼光度法完成一次樣品分析需數小時,不能快速測定[8].利用vc分子中的烯
二醇基將fe3+定量還原成成f2+e與2, 2』-聯吡啶(2, 2-bipyridine)進行顯色反應.並利用2, 2』-bipy-
fe2+-vc顯色體系在本文研究的最佳測定條件下用分光光度法間接測定vc的含量,由於剩餘fe3+的也
能與2, 2』-聯毗啶顯色,可用naf將其掩蔽.此法簡便、快速,結果令人滿意,為食品和藥片中vc含量的
測定提供了方法.
1試驗部分
1. 1主要儀器和試劑
722型光柵分光光度計(山東高密分析儀器廠);電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統****);
六孔數顯水浴鍋(金壇市環保儀器廠);搗碎機.
0·000 125 0mol/l維生素c標準溶液:準確稱取維生素c(分析純) 0·011 01 g,加入適量ph 3三氯
乙酸溶液溶解,定量轉移到500ml的棕色容量瓶中,用ph 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度,暗處放置.
fe3+標準溶液: 0·001mol/l,稱取硫酸鐵銨0·24 g,用1mol/l,的硫酸溶解,用水稀釋到500ml.
2, 2』-聯吡啶: 0·004mol/l,稱取固體物質用少量的無水乙醇溶解,並用水稀釋到250ml.
1mol/l的naf標準溶液.
1·2試驗方法
用移液管移取10mlfe3+標準溶液和一定量的vc標準溶液於50ml比色管中.加入10ml ph 3三氯
乙酸溶液,然後加入一定量的2, 2』-聯吡啶溶液和1mol/lnaf溶液1·00ml,用水稀釋至50ml、搖勻.
室溫條件下靜置10min後置1 cm比色皿中,在分光光度計上以試劑空白為參比,於520 nm波長處測定其
吸光度.
2結果與討論
2. 1測量波長的選擇
按試驗方法以試劑為空白,將顯色後的溶液在400~600 nm區
間內繪製吸收曲線,如圖1所示.結果表明最大吸收波長為520 nm,
實驗選用520 nm為測定波長.
2. 2顯色劑加入量
試驗結果表明, 0·004 mol/l 2, 2』-聯吡啶用量在8·0~10·0
ml範圍內,吸光度達到最大且穩定.本法用量為9ml.
2. 3反應時間與溫度的影響
分別考察了反應時間與反應溫度對體系吸光度的影響,結果表
明,室溫度時定容5~10min之內即可顯色完全,且顯色在100min
內相當穩定.本文選擇在室溫下反應10min.
2·4離於對試劑的選擇
當ctmab加入5ml時對2, 2』-bipy-fe2+-vc形成絡合物的吸光度和吸收波長無顯著影響,而加
入三乙醇胺則可使顯色體系的吸光度增大.
2. 5掩蔽劑及用量選擇
在試驗中發現,被抗壞血酸還原後剩餘的fe3+也可以與2, 2』-聯吡啶生成有色配合物,並在光還原
作用下還原為fe2+與2, 2』-聯吡啶的配合物,因此需要用掩蔽劑來掩蔽剩餘的fe3+,本實驗選用1mol/l
naf溶液作為掩蔽劑,進一步研究表明, 0·25ml以上的1mol/lnaf溶液即能達到掩蔽作用.故本文選用
1ml的1mol/lnaf溶液作為掩蔽劑.
2. 6標準曲線製備
按試驗方法對標準系列進行顯色測定,結果表明:vc質量濃度在0·088~7·0mg/l範圍內符合比爾
113第3期 劉宇奇,楊 睿,楊 泳:光度法測定藥品和食物中的微量vc
定律;迴歸方程為:a=0·003 25+231 49·455 03c(mol/l),相關係數為0. 999 91;表觀摩爾吸光係數ε=
2·40×104l·mol-1·cm-1.
2·7干擾離子的影響
當相對誤差控制在±5%以內,對1·0mg/l的抗壞血酸進行測定時,下列倍數的物質不干擾:na+,
cl-,k+,no3-,zn2+(1 000倍),mg2-, so42+,al3+(500倍), i′(100倍),vitamin b1,vitamin e(100倍),
常見離子中ca2+(1 000倍),ba2+對抗壞血酸的測定產生干擾,但在樣品中ba2+與ca2+的含量一般比較
低.通常不需要分離處理,可以直接測定. 1ml的1mol/lnaf可掩蔽fe3+,體系選擇性較好.
2. 8樣品分析
樣品製備和測定分析
1)vc藥片.分別將市售vc白片和vc黃片各一瓶倒入玻璃研缽中研細,充分混勻後,準確稱取vc
白片0. 019 841 g和黃片0. 0138 6 g置於2個100ml的容量瓶中,用ph 3三氯乙酸溶液浸取並定容.充分
搖動使其粉末分散約1~2min後,立即用乾燥濾紙過濾,棄去初濾液,精密移取過濾液1. 50ml於50ml
比色管中定容,按試驗方法進行測定,結果如表1.
表1 藥片中維生素c含量測定結果(n=6)
tab. 1 the determ ination results of content of
vitam in c in m edical tablet(n=6)
樣品本法測定值g/100 g加入量/μg**率/% rsd /%
vc白片68·02 90 102·8 0·701
vc黃片57·89 89 103·7 0·325
表2 食物中維生素c含量測定結果(n=6)
tab. 2 the determ ination results of content of
vitam in c in foods(n=6)
樣品本法測定值加入量/μg**率/% rsd /%
彌猴桃0·238 g/100g 0·200 98·2 0·541
黃瓜10·03mg/100g 0·200 104·9 1·41
鮮橙多58·50mg/100ml 0·200 96·3 1·08
2)食物樣品.稱取去皮獼猴桃
30·853 9 g和黃瓜25·425 8 g浸在一
定量的ph 3三氯乙酸溶液中,用搗碎
機搗碎混勻並過濾.取過濾後的獼猴
桃果汁置於500ml的容量瓶中、黃瓜
過濾液置於100ml的容量瓶中,並用
ph 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度.充分
搖動1~2min,立即用乾燥濾紙濾去
初濾液,精密分別移取獼猴桃過濾液
1·00ml和黃瓜過濾液5·00ml於50
ml比色管中定容,按試驗方法進行
測定,結果如表2.
3)飲料.移取鮮橙多10·00ml在
一定量的ph 3三氯乙酸溶液中,置於
100ml的容量瓶中,並用ph 3三氯乙酸溶液稀釋至刻度.充分搖動1~2min,精密移取過濾液2·50ml
於50ml比色管中定容,按試驗方法進行測定,結果如表2.
3結語1)從表2中看出,水果中獼猴桃的維生素c含量較為豐富,在日常生活中應多食用這類水果,補充身
體所需營養素.
2)從表1和表2中方法的精密度、**率以及標準曲線的線性關係來看,用分光光度法測定抗壞血酸
是可行的.但是由於抗壞血酸本身性質不穩定,容易降解,因此在進行樣品處理時應注意儘快將樣品搗碎
浸取在緩衝溶液中.
3)水果中含有的鐵都是以有機物形式存在的,不與2, 2』-聯吡啶直接絡合,則不影響測定結果.水果
中的vc在空氣中極易被氧化,樣品處理時必須用保護劑防止vc被氧化.保護劑不能用草酸,因草酸具有
還原性,本法用三氯乙酸緩衝溶液作保護劑.
參考文獻:
[1]閆樹剛,韓濤.果蔬及其製品中維生素c測定方法評價[j].農學通報, 2002, 18(4): 110-112.
114昆明理工大學學報(理工版) 第33卷
[2]楊婷,逯家輝,張大海,等.菲林b近紅外分光光度法測定維生素c[j].分析化學, 2005, 33(11): 1 593-1 595.
[3]陳秋麗,甘振威,張婭捷,等.電位滴定法測定深色蔬菜和水果中的維生素c[j].吉林大學學報:醫學版, 2004, 30(5):
821-822.
[4]陳志慧.荔枝保鮮過程中維生素c的快速電位滴定[j].理化檢驗(化學分冊), 2006, 42(8): 664-665.
[5]李軍.鉬藍比色法測定還原型維生素c[j].食品科學, 2000, 21(8): 42-45.
[6]孫德坤,許月明,吳定.褪色光度法測定果蔬中vc的含量c[j].食品工業科技: 2003, 24(5): 93-95.
[7]胡志群,王惠聰,胡桂兵.高效液相色譜測定荔枝果肉中的糖、酸和維生素c[j].果樹學報, 2005, 22(5): 582.
[8]奚長生.磷鉬藍分光光度法測定維生素c[j].光譜學與光譜分析, 2001, 21(5): 723-725.
(上接第103頁)
該綜合方程的r2更接近1;f值臨界值為6·42,而該方程的f值為30·59;p值減小,表明該回歸方程
具有更好的統計意義.方程說明δe(h-l),q(c5)和el對藥物的活性有較大的影響.活性引數(pic50)
的值越大,藥物作用在受體上的活性越好.從方程可以看出δe(h-l)越小,q(c5)更正(即負電荷越少)
藥物的活性更強.因此可以看出δe(h-l)和q(c5)可能是決定藥物活性的主要因數.el2對藥物活性也
有一定影響,但係數較小,影響也較小.
3結論通過對燈盞花苷ⅰ及其衍生物前線分子軌道的分析和構效關係的計算,計算結果定量的表明,當燈盞
花苷ⅰ及其衍生物作用於受體的時候,δe(h-l)和q(c5)是決定藥物活性的主要因數.文中所得到的表
示pic50與量子化學引數間關係的相關方程式,為類似衍生物的生物活性的**提供了一個簡單可行的
紫外分光光度法,做實驗時繪製標準曲線,為什麼要扣除空白
扣空白,是符合浪白比爾定律的需要 繪製曲線是用扣空白的吸光度對應其濃度,製備標準曲線。分光光度法標準曲線法測樣品時每次需不需要做空白值 一批樣品bai 測定一個平行空 du白即可,不需zhi要全部做。分光光度法dao是通過測定被測物 內質在特定容波長處或一定波長範圍內光的吸光度或發光強度,對該物質進...
原子吸收分光光度法測定微量銅含量實驗中採用標準加入法定量應注
是用火焰法的嗎？對於儀器引數來說，要看你做什麼樣，以及參照儀器說版明和靠經驗了。石墨爐原子吸收光譜法實驗中採用標準加入法定量要注意哪些問題 石墨爐原子吸收光譜法是利用石墨材料製成管 杯等形狀的原子化器，用電流加熱原子化進行原子吸收分析的方法。由於樣品全部參加原子化，並且避免了原子濃度在火焰氣體中的稀...
鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵,鄰二氮菲分光光度法測定微量鐵
參比液選用試劑溶液為參比,因為試劑在512nm處有吸收,所以不能使用蒸餾水做參比液,否則工作曲線不通過原點。比如配製0.001mol l的鐵離子標樣,稱取0.1206g的nh4fe so4 2.12h20 硫酸鐵銨合十二水置於100ml燒杯中,版加入1 1hcl20ml及少權量水,轉至250ml容量...