elisa怎麼判斷一抗是否失效

1樓：cheers張

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試驗結果的判斷主要根據埋型穗所做實驗的說明書進行，現一般按s/co進行判斷，其中s為樣品吸光度，co為k*陰性對照，k值依據所做實驗有所不同。如果沒有光度計 (酶標儀 )靠肉眼判斷 ,則陰、陽性判斷主要靠經驗。 elisa常用結果判定方法如下：

1、定性測定定性測定的結果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單，分別用"陽性"、"陰性"表示。 "陽性"表示該標本在該測定系統中有反應。 "陰性"則為無反應。

用定性判斷法也可得到半定量結果，即用滴度來表示反應的強度，其實質仍是乙個定性試驗。在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋後進行試驗，呈陽性反應的最高稀釋度即為滴度。根據滴度的高低，可以判斷標本反應租鄭性的強弱，這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

在間接法和夾心法elsia中，陽性孔呈色深於陰性孔。在競爭法elisa中則相反，陰性孔呈色深於陽性孔。兩類反應的結果判斷方法不同，分述於下。

1) 間接法和夾心法這類反應的定性結果可以彎卜用肉眼判斷。目視標本也無色或近於無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性。但在elsia中，正常人血清反應後常可出現呈色的本底，此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異，因此實驗中必須加測陰性對照。

陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物(見。在用肉眼判斷結果時，更宜用顯色深於陰性對照作為標本陽性的指標。目視法簡捷明瞭，但頗具主觀性。

在條件許可下，應該用比色計測定吸光值，這樣可以得到客觀的資料。先讀出標本 (sample,s)、陽性對照(p)、和陰性對照(n)的吸光值，然後進行計算。計算方法有多種，大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。

a. 陽性判定值陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照a值加上乙個特定的常數，以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。用此法判斷結果要求實驗條件十分恆定，試劑的製備必須標準化，陽性和陰性的對照品應符合一定的規格，須配用精密的儀器，並嚴格按規定操作。

陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。

2樓：來自楠溪江激昂的海象

目測敬返陪定性法：加入底物經酶解和終止反應後，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深於（競爭世褲法則淺於）陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。

2）以樣品孔亮蠢的od值大於陰性對照od值+2～3sd，作為陽性結果的閾值。

3）以p/n值（陽性孔od值/陰性孔od值）大於或等於為陽性；p/n值小於，但大於為可疑；p/n小於為陰性。

4）定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。