血球計數板使用方法,簡述血球計數板的結構和計數原理

2021-12-19 00:51:32 字數 4565 閱讀 9885

1樓:匿名使用者

血球計數板,通常是一塊特製的載玻片,其上由四條槽構成三個平臺。中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半,每一邊的平臺上各刻有一個方格網,每個方格網共分九個大方格,中間的大方格即為計數室,微生物的計數就在計數室中進行。

計數室的刻度一般有兩種規格,一種是一個大方格分成16箇中方格,而每個中方格又分成25個小方格,共400小格;另一種是一個大方格分成25箇中方格,而每個中方格又分成16個小方格,總共也是400小格。所以無論是哪種規格的計數板,每一個大方格中的小方格數都是相同的。

每一個大方格邊長為1㎜,則每一大方格的面積為1㎜2,蓋上蓋玻片後,載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1㎜,所以計數室的容積為0.1㎜3。其計算方法如下:

1.16×25的計數板計算公式

細胞數 ml=(100小格內的細胞數 100)×400×1000×稀釋倍數

2.25×16的計數板計算公式

細胞數 ml=(80小格內的細胞數 80)×400×1000×稀釋倍數

2樓:匿名使用者

3樓:

按4角及中間5個區觀察數目,大中小格都以此觀察,最後以平均值和格數得出總數,大概是這樣,具體就不記得清楚了

簡述血球計數板的結構和計數原理?

4樓:是嘛

用優質厚玻璃製成。每塊計數板由h形凹槽分為2個同樣的計數池。計數池兩側各有一支援柱,將特製的專用蓋玻片覆蓋其上,形成高0.

10mm的計數池。在血球計數板上,刻有一些符號和數字,xb-k-25為計數板的型號和規格,表示此計數板分25箇中格。

計數原理:在血球計數板上,刻有一些符號和數字,xb-k-25為計數板的型號和規格,表示此計數板分25箇中格。

計數區邊長為1mm,則計數區的面積為1mm,每個小方格的面積為1/400mm。蓋上蓋玻片後,計數區的高度為0.1mm,所以每個計數區的體積為0.

1mm,每個小方格的體積為1/4000mm。

擴充套件資料

誤差控制:

血細胞計數的誤差分別**於技術誤差和固有誤差。其中由於操作人員採血不順利,器材處理、使用不當,稀釋不準確,細胞識別錯誤等因素所造成的誤差屬技術誤差;而由於儀器(計數板、蓋片、吸管等)不夠準確與精密帶來的誤差稱儀器誤差,

由於細胞分佈不均勻等因素帶來的細胞計數誤差屬於分佈誤差或計數域誤差(filederror)。儀器誤差和分佈誤差統稱為固有誤差或系統誤差。技術誤差和儀器誤差可通過規範操作、提高熟練程度和校正儀器而避免或糾正,但細胞分佈誤差卻難於徹底消除。

5樓:匿名使用者

血球計數板(改良牛鮑計數板)

用優質厚玻璃製成。每塊計數板由h形凹槽分為2個同樣的計數池。計數池兩側各有一支援柱,

將特製的專用蓋玻片覆蓋其上,形成高0.10mm的計數池。計數池畫有長、寬各3.0mm的方格,分

為9個大方格,每個大格面積為1.0mm.容積為0.1mm(ul),其中,**大方格用雙線雙成25箇中

方格,位於正中及四角5箇中方格是紅細胞計數區域,用單線劃分為16個小方格。四角的4個大方格

是白細胞計數區域,用單線劃分為16箇中方格。根椐國際標準局(nbs)規定,大方格每邊長度允

許誤差為±1%。 [編輯本段]紅細胞計數公式  紅細胞數/l=n*25/5*10*10^6*200

n為:五個中方格的rbc總數

n*25/5為:**大方格rbc總數(即:0.1mm(ul)的rbc總數)

n*25/5*10為:1mm(ul)rbc總數

n*25/5*10*10^6為:1l的rbc總數

*200為血液的稀釋倍數

公式簡化後:紅細胞數/l=n/100*10^12 [編輯本段]測微尺的構造和使用方法  測微尺分目鏡測微尺和物鏡測微尺.目鏡測微尺用來測量視野中的物體長度;物鏡測微尺是標準長度,用來標定目鏡測微尺.

(1)目鏡測微尺的構造 目鏡測微尺是一塊圓形玻片,其**刻有精確的刻度,通常是將5mm劃分為50格,實際每格等於100μm.刻度的大小隨著使用的目鏡和物鏡的放大倍數而改變,用前必須用物鏡測微尺來標定.

(2)物鏡測微尺的構造 物鏡測微尺為一塊特製的載玻片,其**有一小圓圈.圓圈內刻有分度,將長1mm的直線等分為100小格,每小格等於10μm. [編輯本段]目鏡測微尺的標定  (1)取下目鏡,旋下目鏡上的透鏡,將目鏡測微尺放人目鏡的中隔板上,使有刻度的一面朝下,再旋上透鏡,並裝入鏡筒內.

(2)將物鏡測微尺置於顯微鏡的載物臺上,使有刻度的一面朝上,同觀察標本一樣,使具有刻度的小圓圈位於視野**.

(3)先用低倍鏡觀察,對準焦距,待看清物鏡測微尺的刻度後,轉動目鏡,使目鏡測微尺的刻度與物鏡測微尺的刻度相平行,並使兩尺的左邊第一條線相重合,再向右尋找兩尺的另外一條重合線.(4)記錄二條重合線間的目鏡測微尺的格數和物鏡測微尺的格數. [編輯本段]計算方式  (1)目鏡測微尺每格長度=兩個重疊刻度間物鏡測微尺格數×10/兩個重疊刻度間目鏡測微尺格數

(2)以同樣方法,分別在不同倍率的物鏡下測定測微尺上每格的實際長度.

(3)如此測定後的目鏡測微尺的尺度,僅適用於測定時所用的顯微鏡的目鏡和物鏡的放大倍數.若更換物鏡,目鏡的放大倍數時,必須再進行校正標定. [編輯本段]血球計數板的構造和使用  血球計數板是由一塊比普通載玻片厚的特製玻片製成的.

玻片中有四條下凹的槽,構成三個平臺.中間的平臺較寬,其中間又被一短橫槽隔為兩半,每半邊上面,刻有一個方格網.方格網上刻有9個大方格,其中只有中間的一個大方格為計數室,供微生物計數用.

這一大方格的長和寬各為1mm,深度為0.1mm,其體積為0.1mm3.

計數室通常有兩種規格.一種是大方格內分為16中格,每一中格又分為25小格;另一種是大方格內分為25中格,每一中格又分為16小格.但是不管計數室是哪一種構造;它們都有一個共同的特點,即每一大方格都是由16×25=25×16=400個小方格組成,見圖.

[編輯本段]血球計數板的使用  以計數酵母菌為例

(1)用血球計數板計數酵母菌懸液的酵母菌個數.

(2)樣品稀釋的目的是便於酵母菌懸液的計數,以每小方格內含有4-5個酵母細胞為宜,一般稀釋10倍即可.

(3)將血球計數板用擦鏡紙擦淨,在**的計數室上加蓋專用的厚玻片.

(4)將稀釋後的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置於蓋玻片的邊緣,使菌液緩緩滲入,多餘的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數室內.

(5)計數時,如果使用16格×25格規格的計數室,要按對角線位,取左上,右上,左下,右下4箇中格(即100個小格)的酵母菌數.如果規格為25格×16格的計數板,除了取其4個對角方位外,還需再數**的一箇中格(即80個小方格)的酵母菌數.

(6)當遇到位於大格線上的酵母菌,一般只計數大方格的上方和右方線上的酵母細胞(或只計數下方和左方線上的酵母細胞).

(7)對每個樣品計數三次,取其平均值,按下列公式計算每1ml菌液中所含的酵母菌個數.

3.計算公式

(1)16格×25格的血球計數板計算公式:

酵母細胞數/ml=100小格內酵母細胞個數/100×400×10四次方×稀釋倍數

(2)25格x16格的血球計數板計算公式:

酵母細胞數/ml=80小格內酵母細胞個數/80×400×10四次方×稀釋倍數

4.血球計數板的清潔

血球汁數板使用後,用自來水沖洗,切勿用硬物洗刷,洗後自行晾乾或用吹風機吹乾,或用95%的乙醇,無水乙醇,丙酮等有機溶劑脫水使其乾燥.通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉澱物.若不乾淨,則必須重複清洗直到乾淨為止.

血球計數板的使用方法

6樓:繞指柔

1.視待測菌懸液濃度,加無菌水適當稀釋(斜面一般稀釋100倍),以每小格的菌數可數為度。

2.取潔淨的血球計數板一塊,在計數區上蓋上一塊蓋玻片。

3.將菌懸液搖勻,用滴管吸取少許,從計數板中間平臺兩側的溝槽內沿蓋玻片的下邊緣滴入一小滴(不宜過多),讓菌懸液利用液體的表面張力充滿計數區,勿使氣泡產生,並用吸水紙吸去溝槽中流出的多餘菌懸液。也可以將菌懸液直接滴加在計數區上(不要使計數區兩邊平臺沾上菌懸液,以免加蓋蓋玻片後,造成計數區深度的升高),然後加蓋蓋玻片(勿使產生氣泡)。

4.靜置片刻,使細胞沉降到計數板上,不再隨液體漂移。將血球計數板放置於顯微鏡的載物臺上夾穩,先在低倍鏡下找到計數區後,再轉換高倍鏡觀察並計數。由於生活細胞的折光率和水的折光率相近,觀察時應減弱光照的強度。

5.計數時若計數區是由16箇中方格組成,按對角線方位,數左上、左下、右上、右下的4箇中方格(即100小格)的菌數。如果是25箇中方格組成的計數區,除數上述四個中方格外,還需數**1箇中方格的菌數(即80個小格)。為了保證計數的準確性,避免重複計數和漏記,在計數時,對沉降在格線上的細胞的統計應有統一的規定。

如菌體位於大方格的雙線上,計數時則數上線不數下線,數左線不數右線,以減少誤差。即位於本格上線和左線上的細胞計入本格,本格的下線和右線上的細胞按規定計入相應的格中。見右圖:

即本格中計數細胞為3個。 6.對於出芽的酵母菌,芽體達到母細胞大小一半時,即可作為兩個菌體計算。每個樣品重複計數2-3次(每次數值不應相差過大,否則應重新操作),按公式計算出每ml(g)菌懸液所含細胞數量。

7.測數完畢,取下蓋玻片,用水將血球計數板沖洗乾淨,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免損壞網格刻度。洗淨後自行晾乾或用吹風機吹乾,放入盒內儲存。

急!!關於血球計數板和細菌計數的問題

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