急！！關於血球計數板和細菌計數的問題

1樓：匿名使用者

血球計數法是不能使用油鏡的。因為血球計數法要使用蓋玻片，蓋上蓋玻片可以確保計數室的高度是0.1mm（這個在你的血球計數板的左上角有標註）。

在計數時，還要確保把計數室處於液體不同深度的微生物全部計入。不論是蓋玻片厚度還是計數室的高度，都超過了油鏡的工作距離（一般也就是在0.1mm左右）。

所以，用血球計數法，應使用高倍鏡觀察。對於較大的細胞，如血細胞（名字來由）、酵母細胞，計數沒有問題。對於一般的細菌而言，由於個體太小，在高倍鏡下看不清，不適合用該方法。

2樓：匿名使用者

我這兩天正用這個東西做菌的計數，畫菌的生長曲線，我的理解就是怎麼用這個能計出數來就行是吧？

細菌計數板，我前兩天聽一教微生物的老師說過，國外有這個東西，但國內暫未見到。我用的就是上圖的這個。

你用10倍鏡觀察，就會發現25箇中格，每個中格里有16個小格和16箇中格，每個中格里有25個小格的意思了。菌計數的時候，16箇中格，只要查四個角上的中格里菌數，然後按公式計算就行了。如果是25箇中格，那就四個角的中格加上正中間的中格中菌數，然後按公式計算就行了。

只要理解了25*16和16*25，公式自然就明白了，就自然會用了。

3樓：匿名使用者

1、這兩種計數板的樣子差不多，你的**是血球計數板，主要是蓋玻片下面的液體厚度為0.1mm，比較厚，不適用於細菌計數，細菌比血球小得多，細菌在這麼厚的液體中會有幾層，上層的能看到，下層的就看不到了；好像細菌計數板是0.02mm，反正比0.

1薄。2、你的血球計數板上沒小格的面積是1/400平方毫米，10平方毫米就是4000個小格。不要用這種板子計數細菌了，不準。

3、稀釋平板塗布法：菌液稀釋後塗布平板，培養，數菌落數。定量pcr：提取dna，定量。

4樓：匿名使用者

細菌計數板的使用

準備準備計數時，磨光的表面小心地用擦鏡紙擦乾淨。蓋玻片也要擦乾淨。

蓋上蓋玻片

在需要蓋的周邊區域需要用蒸餾水弄的微溼然後蓋玻片要慢慢的從計數板的前端推入，直到蓋玻片的前端邊緣與計數板的劃格子的區域處於同位。

注意：蓋玻片是很容易壞掉的！

在外部支援和蓋玻片之間的干擾線(牛頓環)的組成顯示了蓋玻片的準確位置。

計數板加樣

取一個良好混合型的吸管並且放置一些初期的幾滴液體。

把吸管的外部擦乾然後保持吸管一定的角度直到小滴液體被吸管尖端吸上去。然後這滴液體被放置在蓋玻片和計數板之間。由於蓋玻片和計數板之間的毛細管現象作用的結果，兩個平面之間的縫隙被灌滿。

在溶液要滿出擊數板截面的邊緣之前，馬上移走吸管的尖端。如果有可見氣泡或者液體已經滿出邊緣並且進入其他的溝裡，那麼計數板就要擦乾淨並且重新加樣。

計數裝載好的計數板被放置在顯微鏡臺上然後計數格在低倍鏡焦距中顯示。高倍物鏡要非常小心的操作，因為計數板比常規的要更厚。如果你不小心的話，會導致計數板或者物鏡鏡頭的損傷。

如果可能的話，在作血細胞計數的時候使用機械平臺的顯微鏡。顯微鏡的照明是重要的，太亮了會影響劃格線的觀察。光可以通過虹膜光圈減弱直到劃得格子在背景中再次清晰可見。

細胞/質粒的計數應該充分稀釋到他們不再互相重疊，並且均勻的分配。

要完成計數檢測需要擴大到期望的可見的細胞/質粒。細胞數量的計算推薦計數100方格作為排除少量的結果。

計數格在超過劃線區域使用時需要均勻的分配，並且這個通過藉由三倍之數決定的方格支架在進入區段之內。

計數完100方格後總數除100(計數的方格數)，來得到每格的平均值。乘稀釋度，除1/4000(每個小方格的立方容積1/20 x 1/20 x 1/10 – 1/4000mm3)。這次計算得到的數字是原非稀釋流質的每立方毫米的細胞數量。

同一種菌液用血球計數板和平板菌落計數法同時計數，所得結果是否一樣？為什麼

5樓：歐陽俠

不一bai樣，直接鏡檢計數，計數的是du直接zhi看到的細菌，無論死活都會

dao被記錄上。相版比之下平板計數法只能權計數活的且只能在所使用的瓊脂平板上能生長的細菌。此外平板計數法計數的細菌咯而不是細菌的個數，假設兩個相同的細菌相距很近，那麼只能形成一個菌落。