高效液相色譜出峰時間由什麼決定的

1樓：匿名使用者

高效液相色譜出峰時間由多種因素決定：

1、固定相（色譜柱填料，長短，粒徑）。

2、流動相（包括有機相水相配比，ph值，有機相組成，水相中緩衝鹽組成，緩衝鹽濃度，是否加入表面活性劑，是否加入離子對試劑等）。

3、流速（改變全部出峰時間，不會改變出峰順序和相對保留時間）。

高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。

2樓：匿名使用者

由流動相和固定相對被測物質的不同選擇性而決定的。次要因素還有流速，柱溫等。

決定因素如下：

1，物質本身性質

2，固定相（色譜柱填料，長短，粒徑）

3，流動相（包括有機相水相配比，ph值，有機相組成，水相中緩衝鹽組成，緩衝鹽濃度，是否加入表面活性劑，是否加入離子對試劑等）

4，流速（改變全部出峰時間，不會改變出峰順序和相對保留時間）5，柱溫

6，色譜儀死體積（不同儀器有差異，同一儀器上測定死體積時間隨流速而有輕微變化）

高效液相色譜對照品穩定性試驗兩個濃度出峰時間不一樣可以用嗎

3樓：匿名使用者

對照bai品穩定性試驗是什麼試驗du？如果說的是對照品溶液穩定zhi性試驗，dao是不需要設定不同濃回度的。

相同濃度在答0、2、4、6、8、12、24小時分別進樣檢視偏差就可以。

再說出峰時間不一致的問題，保留時間的一致性問題一直沒有定論，具體保留時間相差在百分之多少以內或者零點幾分鐘以內，這些說法都沒有準確的出處。你所說的不一樣是相差很多，已經可以判斷為兩個物質了，還是僅僅相差0.5分鐘以內而妄自判斷為「不一樣」。

所以說，這個保留時間的偏差是否可以接受是因方法、因儀器而定的。一般來說連續進樣保留時間可以控制在rsd在0.5%以內，方法重現rsd也不應超過2%，但不是絕對的。

比如一個液相方法，有機相比例對出峰時間影響非常大，而某對照物質在60分鐘以後才會出峰，此時該峰的保留時間重現一般來說是非常差的，有可能換系統後保留時間可以相差3-5分鐘，但這是可以接受的。反過來說，在3~5分鐘內，有兩個甚至更多的峰出現，此時峰保留時間差值應該非常小以保證專屬性。

再比如，你用普通高效液相做樣品，可能保留時間相差1分鐘都是可以接受的，但是如果你做超高效液相色譜，可能1分鐘就有3個峰出現，這時相差1分鐘就是不能接受的。