限制性內切酶能否剪下DNA單鏈,限制性內切酶能切割DNA單鏈嗎?

2021-05-22 05:14:18 字數 4301 閱讀 4695

1樓:匿名使用者

不能,只能識別雙鏈dna的特定序列。

2樓:匿名使用者

不能,限制性內切酶只能識別具有迴文結構的4—6個鹼基對的雙鏈dna

3樓:匿名使用者

答:不能,限制性內切酶只切雙鏈dna.

原因:識別雙鏈dna上的特定序列。(不一定是迴文結構) 進行切割。

4樓:miss十六

不能,限制酶只能識別特定的迴文序列

限制性內切酶能切割dna單鏈嗎?

5樓:字元與標點

限制性內切酶只能識別並切割特異的雙鏈dna序列,這種能被特異性識別的切割部位都具有迴文序列,也就是在切割部位,一條鏈正向讀的鹼基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。我們在說一個限制性內切酶例如ecorⅰ的酶切位點時,只是為了方便只提gaattc,但此處的gaattc是包含雙鏈資訊的(另一條鏈5'到3'的序列也是gaattc)。兩邊加接頭鹼基並不影響酶的識別特異性。

總之,一般來說,限制性內切酶不能切割dna單鏈,除非單鏈內部形成了區域性的迴文結構(可以認做某種意義上的雙鏈)恰好是限制性內切酶的切點。

6樓:匿名使用者

1. 有少數限制性內切酶能切割dna單鏈,效率滿低的。

2. 在末端加一些ggcc的和單雙鏈沒有關係,個人覺得和酶與dna識別binding的結構有關。

常用dna限制性內切酶有哪些?

7樓:hi漫海

內切酶主要分成三大類。

第一類內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內切酶在dna重組技術或基因工程中沒有多大用處,無法用於分析dna結構或克隆基因。這類酶如ecob、ecok等。

第二類內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在該順序內的固定位置上切割雙鏈。由於這類限制性內切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的dn**段,並能構建來自不同基因組的dn**段,形成雜合dna分子。

因此,這種限制性內切酶是dna重組技術中最常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸,少數也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。如果識別位置在dna分子中分佈是隨機的,則識別4個核苷酸的限制性內切酶每隔46(4096)個核苷酸就有一個切點。

人的單倍體基因組據估計為3×199核苷酸,識別4個核苷酸的限制性內切酶的切點將有(3×109/2.5×102)約107個切點,也就是可被這種酶切成107片段,識別6個核苷酸的限制性內切酶也將有(3×109/4×103)約106個切點。

第二類內切酶的識別順序是一個迴文對稱順序,即有一箇中心對稱軸,從這個軸朝二個方向「讀」都完全相同。這種酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割,結果形成兩條單鏈末端,這種末端的核苷酸順序是互補的,可形成氫鍵,所以稱為粘性末端。

如ecori的識別順序為:

↓ |5』……gaa | ttc……3』

3』……ctt | aag……5』

| ↑垂直虛線表示中心對稱軸,從兩側「讀」核苷酸順序都是gaattc或cttaag,這就是迴文順序(palindrome)。實線剪頭表示在雙鏈上交錯切割的位置,切割後生成5』……g和aattc……3』、3』……cttaa和g……5』二個dn**段,各有一個單鏈末端,二條單鏈是互補的,可通過形成氫鍵而「粘合」。另一種是在同一位置上切割雙鏈,產生平頭末端。

例如haeⅲ的識別位置是:

↓5』……gg↓cc……3』

3』……cc↓gg……』

↑在箭頭所指處切割,產生的兩個dn**段是:

5』……gg cc……3』

和3』……cc gg……5』

有時候兩種限制性內切酶的識別核苷酸順序和切割位置都相同,差別只在於當識別順序中有甲基化的核苷酸時,一種限制性內切酶可以切割,另一種則不能。例如hpaⅱ和mspⅰ的識別順序都是5』……ccgg……3』,如果其中有5』-甲基胞嘧啶,則只有hpaⅱ能夠切割。這些有相同切點的酶稱為同切酶或異源同工酶(isoschizomer)。

第三類內切酶也有專一的識別順序,但不是對稱的迴文順序。它在識別順序旁邊幾個核苷酸對的固定位置上切割雙鏈。但這幾個核苷酸對則是任意的。

因此,這種限制性內切酶切割後產生的一定長度dn**段,具有各種單鏈末端。這對於克隆基因或克隆dn**段沒有多大用處。

8樓:匿名使用者

sfii,noti,sali,ecori,ecorv,psti 我在的實驗室經常用的

限制酶可以用來切割rna和單鏈dna嗎?

9樓:小麥水稻雨

限制酶的作用是切開雙鏈dna分子之間的磷酸二酯鍵,並且具有專一性,只能識別特定的酶切位點。

10樓:匿名使用者

限制酶全名是 限制性核酸內切酶

但是 這個核酸僅僅是指 dna 雙鏈 不包括rna

至少現在沒有發現切割rna和單鏈dna

11樓:匿名使用者

不可以,只能識別有特定的酶切位點的雙鏈dna

限制性核酸內切酶切割的原理和方法

12樓:匿名使用者

就是限制酶會特異性識別特定的核苷酸序列,然後切斷磷酸二酯鍵

為什麼限制性內切酶不剪下細菌本身的dna??

13樓:e拍

因為通過長期的進化,細菌中含有某種限制酶的細胞,其dna分子中或者不具備這種限制酶的識別切割序列。

或者通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的鹼基上,使限制酶不能將其切開。這樣,儘管細菌中含有某種限制酶也不會使自身的dna被切斷,並且可以防止外源dna的入侵。

限制性內切酶能**dna分子在一限定數目的專一部位上,它能識別外源dna並將其降解。

限制性核酸內切酶是由細菌產生的,其生理意義是提高自身的防禦能力。

擴充套件資料

限制酶在分子生物學與遺傳工程領域有廣泛的應用,此類酵素最早發現於某些品系的大腸桿菌體內,這些品系能夠「限制」噬菌體對其感染,因此得名。

科學家認為限制酶是細菌所演化出來對抗病毒感染,並幫助將已殖入的病毒序列移除的機制。是限制修飾系統的一部分。

約翰霍普金斯大學的丹尼爾·那森斯、漢彌爾頓·史密斯與伯克利加州大學的沃納·亞伯因為限制酶的發現及研究,而共同獲得2023年的諾貝爾生理學或醫學獎。

此酵素最早的應用之一,是用來將胰島素轉基因到大腸桿菌,使其具備生產人類胰島素的能力。

14樓:多1°c熱愛

細菌中限制酶之所以不切斷自身dna,是因為微生物在長期的進化過程中形成了一套完

善的防禦機制,對於外源入侵的dna可以降解掉。生物在長期演化過程中,含有某種限制酶的細胞,其dna分子中或者不具備這種限制酶的識別切割序列,或者通過甲基化酶將甲基轉移到所識別序列的鹼基上,使限制酶不能將其切開。這樣,儘管細菌中含有某種限制酶也不會使自身的dna被切斷,並且可以防止外源dna的入侵

所以,細菌記憶體在「修飾—限制系統」,即修飾酶和限制酶是同時存在的,是對立統一的,互相調節,互相監督的。

15樓:朱雀☆鼬

因為細菌本身的dna可能沒有這個限制性內切酶識別的序列

還有就是用-nh3保護

根據基因工程的有關知識,回答下列問題:(1)限制性內切酶切割dna分子後產生的片段,其末端型別有______

16樓:1滋莆

(1)經限bai制性核酸內切酶切割後能形du成兩種型別的末端zhi,即平末端和dao黏性末端.

(專2)為了便於

相連,兩種不同屬限制酶切割之後所產生的黏性末端必須相同.(3)dna連線酶分為兩類:e.colidna連線酶和t4dna連線酶.這二者都能連線黏性末端,此外t4dna連線酶還可以連線平末端,但連線平末端時的效率比較低.

(4)反轉錄是以mrna為模板逆轉錄先合成單鏈dna,再合成雙鏈dna,利用pcr技術進行大量擴增.

(5)基因工程常用的運載體:質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒.(6)當受體細胞是細菌時,為了增大匯入的成功率,常用ca2+處理,得到感受態細胞,此時細胞壁和細胞膜的通透性增大,容易吸收重組質粒.未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源dna)的能力極弱.

故答案為:

(1)黏性末端   平末端

(2)切割產生的dn**段末端與ecori切割產生的相同(3)大腸桿菌   t4

(4)mrna(或rna)  cdna(或dna)   pcr(5)噬菌體   動植物病毒

(6)未處理的大腸桿菌吸收質粒(外源dna)的能力極弱

常用dna限制性內切酶有哪些,常用DNA限制性內切酶有哪些?

內切酶主要分成三大類。第一類內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內切酶在dna重組技術或基因工程中沒有多大用處,無法用於分析dna結構或克隆基因。這類酶如ecob ecok等。第二類內切酶能識別專一的核...

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