核酸含量的測定方法及原理都有哪些

1樓:

核酸定量常用方法如下:

1 光吸收法:核酸中鹼基共軛結

構在近紫外光波長260nm處有最大版吸收,吸收強度與核酸濃度權成正比,因此可以用於核酸定量.

2 定p法:核酸中p含量約為9.5%,因此可以通過測定樣品中的有機p量來進行核酸定量.

3 核糖含量測定法:包括rna的地衣酚法及dna的二苯胺法.

4 定量pcr法:定量pcr技術是指以外參或內參為標準,通過對pcr終產物的分析或pcr過程的監測,進行pcr起始模板量的定量.

5 核酸雜交半定量法:通過探針與核酸在膜上雜交顯色,與標準品顯色進行比較從而進行半定量.

核酸含量的測定紫外吸收法的原理是什麼?

2樓:匿名使用者

核苷、核苷酸、核酸的組成成分中都有嘌呤內、嘧啶鹼基容,這些鹼基都具有共軛雙鍵 ( -c-c=c-c=c-),在紫外光區的250-280nm處有強烈的光吸收作用,最大吸收值在260nm左右。常利用核酸的紫外吸收性進行核酸的定量測定。

核酸的摩爾消光係數ε(p)表示為每升溶液中含有1摩爾原子磷的光吸收值。rna的ε(p)260nm(ph7.0)為7 700~7 800,rna的含磷量約9.

5%,因此每毫升溶液含1μg rna的光吸收值相當於0.022~0.024。

小牛胸腺dna鈉鹽的ε(p) 260nm(ph7.0)為6 600,含磷量為9.2%,因此每毫升溶液含1μg dna鈉鹽的光吸收值相當於0.

020。

3樓:匿名使用者

蛋白質也有紫外吸收復,通制常蛋白質的吸收高峰在280nm波長bai處,在260nm處的吸收du值僅為核酸的zhi1/10或更低,因此對於含有微量dao蛋白質的核酸樣品,測定誤差較小。若待測的核酸製品中混有大量的具有紫外吸收的雜質,則測定誤差較大,應設法除去。不純的樣品不能用紫外吸收值作定量測定。

從a260/ a280的比值可判斷樣品的純度。純rna的a260/ a280≥2.0;dna的a260/ a280≥1.

8。當樣品中蛋白質含量較高時,則比值下降。rna和dna的比值分別低於2.

0和1.8時,表示此樣品不純。

生物幫上面有這方面的詳細介紹, 生物問答 http://****zhibio.***/

核酸含量的測定方法及原理都有哪些?

4樓:匿名使用者

核酸定量常用方法及原理如下:

1、光吸收法:核酸中鹼基共軛結構在近紫外光波長260nm處有最大吸收,吸收強度與核酸濃度成正比,因此可以用於核酸定量。

2、定p法:核酸中p含量約為9.5%,因此可以通過測定樣品中的有機p量來進行核酸定量。

核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,為生命的最基本物質之一。

核酸廣泛存在於所有動植物細胞、微生物體內,生物體內的核酸常與蛋白質結合形成核蛋白。不同的核酸,其化學組成、核苷酸排列順序等不同。根據化學組成不同,核酸可分為核糖核酸(簡稱rna)和脫氧核糖核酸(簡稱dna)。