真菌保種取上清液還是菌

2025-04-23 05:16:25 字數 2197 閱讀 3046

1樓:趙抗黎美

應該取菌。為了得到某種藥用真菌的純菌種,拿晌必須將它從其周圍的其他生物或微生物中分離出來。分離工作要根據藥用真菌的特性,從分離方法、培養基的種類、培養條件的控制以及在培養基中是否新增某種抑制劑等等綜合考慮,否則達不到分離菌種的有效目的。

純菌種的分離方法大致有三種:組織分離、孢子分離及寄主分離。

一)組織分離法。

利用幼嫩組織中的菌絲,在無菌條件下,接種在培養基上,重新恢復為沒有組織分化的菌絲體,這種方法分離得到的菌種生命力強,菌絲生長快,得到純菌的生活率較高。此法適應範圍較廣,特別是對有些孢子不易萌發或萌發速度不一致的種類以及菌核、菌索等組織,採用此法為宜。

進行組織分離,事先要對分離材料進行選擇,要求材料必須是品系純正,品質優良,幼嫩肥壯而無病蟲害,然後進行表面消毒處理。先用清水洗淨外面沾附的泥土或雜物,放入無菌操作室(櫃)中的無菌器皿內,用表面消毒劑(如昇汞、10%漂白粉、70—75%酒精、5%來蘇兒或2%甲醛等)溶液浸泡一定時間。消毒時間要根據消毒劑的特性和菌體組織的質地、大小而定。

一般如菇類(香菇、蜜環菌)鮮嫩的組織,消毒時間要短,控制在分鐘,這樣既不會傷害組織又能達到組織表面殺菌的目的;像表皮組織比較厚的豬苓菌核,在5%的來蘇兒溶液中泡半小時以上,不致影響生活力。昇汞溶液殺菌力較強,組織經表面消毒後,必須再經無菌水改敏胡沖洗,去掉附著的殘留藥物,以免影響菌體萌發生長。無菌水沖洗後要用滅菌濾紙吸去沾附的水分,用無菌刀將組織切割成約小塊,分別放置在預先滅過菌而裝有培養基的培養皿或試管中,一般每皿5塊左右,排開保持一定間隔,試管內僅放1塊為宜。

培養時將皿底朝上,置24—28℃恆溫下培養數天,組織塊周圍就可長出新的菌絲,再經純化即可得到純菌種。

表面消毒時,如方法掌握不當或無菌操作不嚴格,往往核攔會造成汙染,消毒過度則菌體本身生活力喪失而分離不出純菌種,分離多孔菌類或菌肉較肥厚的傘菌類真菌,也可不用藥劑浸泡,只要用70—75%酒精棉塗擦外皮後,去掉表皮,挑取內部組織塊直接進行分離。為了防止細菌感染,可將要分離的組織小塊用金黴素(或鏈黴素)浸蘸一下再移置。為防止培養基上汙染細菌可在每毫公升培養基內加入氯黴素,因它較前兩種穩定、耐高溫,可與培養基一同高壓滅菌。

2樓:生活助手小一

專利名稱:菌種保藏液和菌種保藏方法。

技術領域:本發明屬於微生物工程技術領域,具體涉及一種菌種保藏液和菌種保藏方法。

背景技術:菌種保藏在微生物研究及實際應用中必不可少。由於微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處於最不活躍或相對靜止的狀態,才能在長時間內使其不發生變異而又保持生活能力。

目前菌種保藏方法主要有以下幾種。

i)傳代培養保藏法。該方法又包括斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養作保藏厭氧細菌用)等幾種。 (2)液體石蠟覆蓋保藏法。

該方法是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間。(3)載體保藏法。該方法是將微生物吸附在適當的載體(如土壤兄圓、沙子、矽膠等)上,然後進行乾燥的保藏法。

4)寄主保藏法。用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代,此法相當於一般微生物的傳代培養保藏法。(5 )冷凍保藏法。

可分為低溫冰箱法(-20 v -30 v或者-50 v _80 v )、乾冰酒局塵悔精快速凍結法(約-70 °c)和液氮法(_196°c)等。上述幾種方法各有優桐正缺點,但總的來說仍然存在以下缺點(1)不能長時間維持微生物活力,保藏期較短。(2)生物安全性較低,儲存效能較低。

3)操作繁瑣,儲存不便,難以轉運。(4)當菌種數量較多時,儲存空間較大,而且不便查詢。

3樓:蛋蛋的丹丹

從土壤中分離出具有譽銷高度鎮薯抗植物真菌活性的芽孢桿菌屬新菌種(尤其是稻梨孢和絲核薄膜革菌)並進行了鑑定;將培養液離心處理,用乙酸乙酯提取上清液,收集有機層。蒸發處理活性部御虛者分,用甲醇溶解之,然後進行矽膠柱層析處理;蒸發處理活性部分,用二氯甲烷:甲醇(1∶5)混合液溶解並進行sephadex lh-20柱層析處理。

蒸發處理活性部分,用水溶解並凍幹。將上面得到的粉狀抗菌素溶於甲醇,在4℃條件下貯存,製備出晶狀抗菌素三己黴素;三己黴素在50-100mg/ml的濃度下對被真菌感染的植物具有高度抗真菌活性。三己黴素由3個果糖單位組成,表現出無毒特性。

4樓:kk康康

純甘亮扮油高壓滅菌後首鍵燃分裝-20℃儲存待用;

離心管單獨滅菌;

我們儲存菌種時取800微公升的菌液置於離心管中,再取分裝好的純甘油200微者虛公升與菌液混合,劇烈**,充分混勻,置-20℃或-80℃儲存均可。

保膽取石術後能喝純牛奶嗎,保膽取石手術後20天可以喝牛奶嗎?

牛奶只限於飲用脫脂牛奶。膽結石飲食因該注意 1.膽結石首重飲食的控制,養成定時定量 少量多餐 忌暴飲暴食良好的飲食習慣。平時應減少脂肪的攝取,包括肥肉 豬油 牛油 蛋黃 蝦蟹 動物內臟 腦 腎 心 肝 牡蠣 魚卵 奶油 蛋糕及油炸類食物等 動物肝 腎 魚卵及蛋黃等含高膽固醇食物,也應該少吃為宜。2....

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