dapi染色能否區分活死細胞

2022-09-18 12:46:53 字數 2289 閱讀 1204

1樓:酸酸可愛多

dapi染色不能區分活死細胞,因為dapi可以透過完整的細胞膜,它可以用於活細胞和固定細胞的染色。活細胞死細胞都能夠被dapi染色,所以光看到藍色熒光,無法區分。

dapi是一種能夠與dna強力結合的熒光染料,常用於熒光顯微鏡觀測。類似於dapi技術,赫斯特染色是一種既可以用於活細胞也可以用於固定細胞的藍色熒光染料,並且可以使用與dapi相同的機器濾鏡設定。

2樓:匿名使用者

dapi能快速進入活細胞中與dna結合,因此dapi對生物體而言,也被視為一種毒性物質與致癌物。cm-dil是標記細胞膜的,而dapi是標記細胞核的

可以是活細胞,一人做兔子的膀胱腫瘤,他說在14天的時候很強,21天的時候比較弱,再長的時間就沒有檢測過。

文獻上說50天以後還可以看到dapi的標記

3樓:糟油酒丸

一樓的意思是活細胞死細胞都能夠被dapi染色。所以光看到藍色熒光,判斷不出來。

但聽說死細胞染色比較快。活細胞的話dapi進入會相對困難一些。

再者dapi有毒性,所以活細胞被進入之後多久會死掉,也是個問題。

總之,dapi染色不適合用於判斷細胞的活性。

hochest染色和dapi染色有什麼區別

4樓:北京索萊寶科技****

1、每個染料有自己獨特的激發譜線和發射譜線.這也是以上兩個染料的主要區別. 另外hoechest 33258 是膜透性的,因此在活細胞時候能輕鬆進入;dapi是半透性的,有選擇性的進入.

因此hoechest 33258 一般用來染活細胞,可以長驅直入;dapi一般是染固定細胞.

2、兩者都可以用紫外看,參見以下的激發發射波長

hoechst 33258的最大激發波長為346nm,最大發射波長為460nm;hoechst 33258和雙鏈dna結合後,最大激發波長為352nm,最大發射波長為461nm。

dapi的最大激發波長為340nm,最大發射波長為488nm;dapi和雙鏈dna結合後,最大激發波長為364nm,最大發射波長為454nm。

鈣黃綠素可以用於固定細胞染色嗎

5樓:匿名使用者

因為dapi可以透過完整的細胞膜,dapi能快速進入活細胞中與dna結合,它可以用於活細胞和固定細胞的染色。

dapi染色原理:

dapi 為一種熒光染料,可以穿透細胞膜與細胞核中的雙鏈dna結合而發揮標記的作用,可以產生比dapi自身強20多倍的熒光,和eb相比,對雙鏈dna的染色靈敏度要高很多倍。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞,熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高(幾乎為100 %) 。dapi染色常用於細胞凋亡檢測,染色後用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。

dapi也常用於普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈dna染色。細胞經熱激處理後用dapi染色3分鐘,在熒光顯微鏡下可以看到到細胞核的形態變化。

a、 正常的菸草細胞核:核形完整,染色質均勻。

b、染色質固縮,向外周聚集,形成周邊化。

c、 染色質進一步固縮,形成很多顆粒物質。

d、 細胞核破裂形成碎片,核解體。

6樓:匿名使用者

不可以,鈣黃綠素是活細胞染料,需要胞內有活性的酯酶分解才能發光。

7樓:井底之蛙

鈣黃綠素calcein,而不是dapi。它能夠很好的對活細胞進行染色,對死細胞不能染色。

8樓:傲嬌的貓小喵

鈣黃綠素,也稱為熒光素,熒光素複合物,是一種熒光鈣指示劑,其激發和發射波長分別為495和515nm。鈣黃綠素在100 mm以上的濃度下會自動猝滅。它用作edta滴定鈣離子和熒光測定鈣的絡合指示劑,微溶於水。

質子解離常數為pka1的= 2.1,pka2 = 2.9,pka3 = 4.

2,pka4 = 5.5,pka5 = 10.8和pka6 = 11.

7。鈣黃綠素溶液在酸性條件下發出黃綠色熒光,而在鹼性條件下不發出熒光。但是,鈣黃綠素在鹼性條件下在金屬離子(例如al,ba,cu,mg和zn)存在下發出熒光。

因此,鈣黃綠素還可以用於除ca之外的這些重金屬離子的直接熒光滴定。

熒光顯微鏡觀察細胞凋亡為什麼用dapi不用pi

9樓:約好了以後

原理不同:dapi染的是雙鏈dna,pi染的是dna和rna。pi可以把細胞漿中的非特異性核酸,比如rna也染上顏色。所以這個時候可以先用rna酶處理一下。

2.顏色不同,dapi在熒光顯微鏡看到的是紫藍的光,pi則顯示桔紅色的光芒。

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