為什麼pcr陰性總有條帶出現,為什麼我的PCR陰性對照總是跑出陽性條帶

2021-03-03 21:07:09 字數 1402 閱讀 5503

1樓:羽動一生

提高退火溫度,或重新設計引物,或者是陰性對照被汙染,當然還有其它好多小原因,要是還沒解決,請細說並追問。

為什麼我的pcr陰性對照總是跑出陽性條帶

2樓:龍鳳油洺月

實驗室體系或者環境有汙染,把所有的物料都換了,同時換一個房間重做,試試吧

古菌pcr陰性對照為什麼有條帶

3樓:阿魯巴星人

說明引物有非特異性擴增。所以,當你的樣品中出現一模一樣的條帶的時候,要小心了,說明這條帶可能是非特異性擴增引起的。

陰性對照怎麼總是有目的條帶

4樓:

假陽性是來指不含目的片段源的模板

,經過pcr,批出了與bai目的模du板bp數類似的片段zhi,給人一種含有目的片段的dao假象.說明是汙染造成擴增的。 假陰性是說,你的樣品中有目的片段,但由於實驗條件不合適,沒有p出目的條帶,這種情況讓人誤以為是陰性,所以叫假陰性.

說明反應體系中存在抑制物。

為什麼pcr之後的電泳會出現這樣的條帶

5樓:南京金益柏生物科技****

說明目的基因已經擴增得到

6樓:匿名使用者

第二、可以考慮克隆測序,這樣不容易產生結合.cindybrella(站內聯絡ta):tiger28:

幫頂!我也不懂~哎:tiger19:

jiaxinfish(站內聯絡ta)b保險點的話還是做個taclone再測序,如果不想做ta,就用2個pcr引物直接測序,總會成功一個的吧blackrose8089(站內聯絡ta)換個測序公司試一下,有的公司就是克隆在載體上也測不出來!zoey21(站內聯絡ta)我的pcr產物電泳很好,測序也是結合問題.測序公司反饋說是產物不純,或者引物特異性不好.

你可以考慮重新優化反應體系(不過看來你是不做這步了),或者把目的片段序列告訴測序公司,他們會設計中間引物安排測序.

7樓:匿名使用者

可以考慮克隆測序,這樣不容易產生結合.cindybrella(站內聯絡ta):tiger28:

幫頂!我也不懂~哎專:tiger19:

jiaxinfish(站內聯絡ta)b保險點的話還是屬做個taclone再測序,如果不想做ta,就用2個pcr引物直接測序,總會成功一個的吧blackrose8089(站內聯絡ta)換個測序公司試一下,有的公司就是克隆在載體上也測不出來!zoey21(站內聯絡ta)我的pcr產物電泳很好,測序也是結合問題.測序公司反饋說是產物不純,或者引物特異性不好.

你可以考慮重新優化反應體系(不過看來你是不做這步了),或者把目的片段序列告訴測序公司,他們會設計中間引物安排測序.

為什麼pcr之後的電泳會出現這樣的條帶

說明目的基因已經擴增得到 第二 可以考慮克隆測序,這樣不容易產生結合.cindybrella 站內聯絡ta tiger28 幫頂 我也不懂 哎 tiger19 jiaxinfish 站內聯絡ta b保險點的話還是做個taclone再測序,如果不想做ta,就用2個pcr引物直接測序,總會成功一個的吧b...

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